满洲里检验检疫局技术中心动检实验室参加了由北京出入境检验检疫局技术中心所组织的样品能力验证(H5亚型禽流感病毒核酸检测),实验室使用荧光定量PCR法检测样品中H5亚型禽流感病毒核酸,6个样品检测结果完全满意。
流感病毒属于RNA病毒的正黏病毒科,分甲、乙、丙3个型。其中甲型流感病毒多发生于禽类,也可感染猪、马、海豹和鲸类等哺乳类动物和人类。乙型和丙型流感病毒则分别见于海豹和猪的感染。甲型流感病毒呈多形性,其中球形直径80~120nm,有囊膜。基因节为分节段单股负链RNA。依据其外膜血凝素(H)/和神经氨酸酶(N)蛋白抗原性的不同,可分为16个H亚型(H1~H16)和9个N亚型(N1~N9)。感染人的禽流感亚型主要为H5N1、H9N2、H7N7,其中H5N1高致病亚型,死率高。
荧光定量PCR技术是于20世纪90年代由美国Applied Biosystems公司推出的一种新型核酸定量技术。该技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,同常规PCR法相比,该方法特异性和可靠性更强,能实现多重反应,且采用了完全闭管检测,不需PCR后处理,有效解决PCR污染问题以及EB对试验人员的伤害,再配以相应的荧光PCR仪,使整个PCR过程实现自动化,加之具有耗时短,操作方便等特点而备受推崇,因而广泛应用于基因表达研究、转基因产品安全检测、单核苷酸多态性(SNP)研究及病原体检测等领域。
这次参加动物检疫能力验证实验,有着重要意义:一通过此次的能力验证工作建立起了完整的实时荧光PCR检测技术,为以后的动物检疫项目开展打下了稳定的基础。二为动物检疫实验室将来参加的国家相关的实验室认证认可做了稳固的技术支撑。 (杨东来)