深圳检验检疫局动植中心动检实验室近年来一直致力于禽流感病毒和新型甲型H1N1流感病毒的快速检测和研究,目前已建立了多种流感病毒的分子生物学检测方法,包括H7亚型禽流感病毒、H5亚型禽流感病毒、H9亚型禽流感病毒以及新型H1N1流感病毒的荧光RT-PCR方法,在经深圳口岸进出境动物和动物产品检测和监测中得到了广泛应用,保证了进出境食品的安全卫生,促进了当地养殖业的发展。
流感病毒可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型。甲型流感由于可以在人和动物之间进行传播,是人和动物防控的重点。依据流感病毒特征可分为HxNx共135种亚型。既往确认感染人的禽流感病毒有H5N1、H5N2、H9N2、H7N2、H7N3、H7N7、H10N7,症状表现各不相同,可以表现为呼吸道症状、结膜炎,甚至死亡。H7N9亚型禽流感病毒是禽流感病毒的一种,既往仅在禽间发现,未发现过人的感染情况。该病毒致病性强、危害性大,是进出口家禽及禽类产品的主要检疫对象。
为加强对H7亚型禽流感病毒的检测,深圳局通过对美国国家生物技术信息中心建立的DNA序列数据库已报道的H7亚型禽流感病毒的HA基因进行序列分析比较,设计了两套分别针对H7N2亚型和H7NX亚型的特异性引物和探针,建立了H7亚型禽流感病毒实时荧光定量RT-PCR方法。该方法特异性好,解决了美国农业部和欧盟H7亚型实时荧光RT-PCR方法存在漏检的问题;敏感性高,对禽流感病毒H7亚型标准HI抗原检测的敏感性达到10-5,能够满足口岸禽流感病毒快速、准确、有效的检疫需求。
(张彩虹 秦智锋)